高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。廣泛應用于生命科學、食品科學、藥物研究以及環境研究中。

 

工作時儲液器中的流動相被高壓泵壓入檢測系統，樣品溶液經進樣器進入色譜系統，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，在其通過檢測器時，被轉換成信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式輸出。

 

高效液相色譜儀的柱壓是否穩定與色譜圖峰形好壞、分離效果、保留時間等有著密切關聯。以下是常見的幾種柱壓問題及解決方法：

 

(1)柱壓升高

①色譜柱被堵塞，解決方法更換新的色譜柱；

②系統壓力零點飄移，解決方法:調節壓力傳感器的零點；

③阻尼器堵塞，解決方法:拆下后進行超聲波清洗或更換新的阻尼器；

④進樣器、管路或連接口堵塞，解決方法:參見說明書進行清洗。

 

(2)柱壓降低:

①無流動相流出，解決方法:檢查貯液瓶中有無流動相、沉子是否浸沒在流動相中、泵是否運行；

②系統存在漏液，解決方法:檢查各部件的連接點，進行再次固定；

③參比閥未關閉，解決方法將流速降低后關閉參比閥。

 

(3)柱壓不穩

①系統管路中存在氣泡，解決方法重新進行排氣操作；

②沉子表面的小孔被堵，解決方法:將沉子取下后進行超聲波清洗。